Spôsob údržby a používania ultrafiltračnej trubice

Spôsob údržby a používania ultrafiltračnej trubice

Funkcia ultrafiltračnej trubice:

1) koncentrácia; 2) odsoľovanie; 3) Vymeňte vyrovnávaciu pamäť; 4) Má za následok čiastočné čistenie.

1. Novú ultrafiltračnú trubicu možno použiť priamo bez ďalšej úpravy;

2. Ultrafiltračná trubica nemôže byť sterilizovaná pri vysokej teplote;

3. Úprava ultrafiltračnej skúmavky pri výmene koncentrovaného proteínu

Ultrafiltračná trubica môže byť znovu použitá. Namočte ho do 0.1M NaOH na 1-2 hodiny, premyte vodou a potom 3-krát premyte príslušným roztokom (sterilizovaná voda alebo PBS) na centrifúge, ktorý možno použiť na zahustenie nového proteínu;

4. Ošetrenie normálne umiestnenej ultrafiltračnej trubice

Často používanú ultrafiltračnú trubicu namočte do 0,1 M NaOH na 1-2 hodiny, umyte ju vodou a namočte do sterilizovanej vody. Dbajte na to, aby bola membrána filtra vlhká a zabránila množeniu baktérií;

5. Liečba ultrafiltračnej trubice umiestnenej na dlhú dobu

Ak sa ultrafiltračná trubica dlhší čas nepoužíva, namočte ju do 0,1 M NaOH na 1 až 2 hodiny, umyte ju vodou a na uskladnenie namočte do 20-percentného etanolu. Dbajte na to, aby bola membrána filtra vlhká a zabránila množeniu baktérií;

6. Rýchlosť odstredenia používaná pre ultrafiltračnú trubicu

Rýchlosť odstredenia je vo všeobecnosti 4000 ot./min. (všeobecne sa odporúča 3000 g a maximum nesmie prekročiť 4000 g). Po 5-8minútovom odstreďovaní možno 4ml vzorku skoncentrovať na menej ako 1ml až desiatky mikrolitrov; Ak je rýchlosť príliš vysoká, cieľový proteín odpadne, čo vedie k strate cieľového proteínu; Nízka rýchlosť, časovo náročná a nízka efektivita práce;

7. Preventívne opatrenia, keď hlava pištole zasahuje do ultrafiltračnej trubice

Pri pridávaní proteínového roztoku alebo pufra do ultrafiltračnej skúmavky je možné použiť modrú hlavu pištole; Keď sa však koncentrovaný cieľový proteín absorbuje zo spodnej časti ultrafiltračnej skúmavky, musí sa použiť žltá hlavica pištole; Keď je hlava pištole vložená do ultrafiltračnej trubice, musí sa zabrániť jej dotyku s membránou filtra, aby nedošlo k prepichnutiu membrány filtra;

8. Znížte stratu adsorpcie proteínov v ultrafiltračnej skúmavke

Membrána ultrafiltračnej skúmavky môže adsorbovať proteín, čo zníži cieľový proteín asi o 30 percent; Aby sa znížila strata proteínu, po absorbovaní roztoku cieľového proteínu prepláchnite dno ultrafiltračnej skúmavky proteínovým pufrom, aby sa premyla väčšina proteínu adsorbovaného membránou filtra a znížila sa strata cieľového proteínu; Ak je purifikovaný proteín koncentrovaný, dávajte pozor, aby koncentrovaný objem nebol príliš malý; Vo všeobecnosti, bez ohľadu na to, ako sa odstredí, asi 200 ul proteínového roztoku zostane na dne;

9. Ako definovať poruchu ultrafiltračnej trubice

Pri bežnom používaní, keď membrána filtra nie je prepichnutá, koncentrovaný proteínový roztok neobsahuje proteín alebo je jeho množstvo veľmi nízke (vrátane cieľového proteínu), zatiaľ čo prvý filtrovaný roztok obsahuje cieľový proteín, znamená to, že membrána filtra je neplatná a je potrebné vymeniť za novú ultrafiltračnú trubicu.