CM slaboiónová{0}membránová chromatografia

SP Strong katiónová výmenná membránová chromatografia Predstavenie produktu 

 

2. Výhody produktu

Rýchla a efektívna Vysoká väzbová kapacita sa dá dosiahnuť pri prietokoch až 40-krát rýchlejších ako tradičná živicová chromatografia. V porovnaní s konvenčnou živicovou- chromatografiou možno čas procesu s použitím membránovej chromatografie skrátiť 30 až 40-krát. Typický prevádzkový prietok je okolo 10 MV/min.

2.2 Vysoká väzbová účinnosť Membránová chromatografia vykazuje vysokú väzbovú kapacitu a vysoké prietokové rýchlosti pri nízkom poklese tlaku, čo umožňuje zachytiť nabité biomolekuly jediným prechodom cez modul.

2.3 Škálovateľné a flexibilné Celý rad produktov pre membránovú chromatografiu dokáže uspokojiť rôznorodé potreby čistenia biomolekúl, ktoré zahŕňajú aplikácie od vývoja procesov až po-výrobu vo veľkom meradle. Konštrukcia kapsuly umožňuje jednorazové{3}}použitie alebo ju možno vyčistiť a znova použiť po správnych čistiacich postupoch.

2.4 Vylepšená produktivita Kompaktný dizajn minimalizuje pôdorys zariadenia. Elimináciou operácií, ako je plnenie kolóny, čistenie, validácia čistenia a skladovanie kolóny, môže spracovanie začať po jednoduchej ekvilibrácii s relatívne menším množstvom pufra. Keďže nie je potrebné balenie, čistenie alebo skladovanie kolóny, náklady na prácu sa môžu znížiť o viac ako 50 %.

 

 

3 Technické parametre

3.1 Konštrukčné materiály

	Laboratórna mierka	malého rozsahu	pilotná mierka	výrobného rozsahu
objem membrány	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Membránová nosná štruktúra	Polypropylén
membránové puzdro	Polypropylén
O krúžok	Silikón

3.2 Prevádzkové charakteristiky

	Laboratórna mierka	malého rozsahu	pilotná mierka	výrobného rozsahu
objem membrány	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Odporúčaný prietok	1-6 ml/min	25-150 ml/min	2-12 l/min	25-150 l/min
Maximálna prevádzková teplota	35 stupňov
Maximálny prevádzkový tlak	3 bar (25 stupňov)
Maximálny tlakový rozdiel	3 bar (25 stupňov)
Podmienky skladovania	20% eetanolafrontovýsriešenie

Porovnanie ukazuje, že životnosť SP membránovej chromatografie je porovnateľná so životnosťou SP Sepharose 6FF.

Obrázok 1. Zmeny väzbovej kapacity SP membránovej chromatografie po viacnásobnom použití testovanej s lyzozýmom

Okrem toho sme hodnotili membránovú chromatografiu z hľadiska jej účinnosti pri odstraňovaní proteínov hostiteľskej bunky a nukleových kyselín. Výsledky sú nasledovné:

	DNA				HCP
	Zotavenie IgG	Obsah (pg/mg IgG) pomocou RT PCR		Faktor odstránenia	Obsah (ng/mg IgG) od Elisa		Faktor odstránenia
Bežať	%	Pred Q membránou	Po Q membráne	Log	Pred Q membránou	Po Q membráne	Log
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Tabuľka 1. Miery odstraňovania proteínov z DNA a hostiteľských buniek v CHO -exprimovanom IgG materiáli pomocou SP membránovej chromatografie

Séria experimentov ukázala, že SP membránová chromatografia môže účinne odstrániť kontaminanty pri zachovaní vysokej rýchlosti regenerácie cieľového IgG.

Pri porovnaní membránovej chromatografie Gudiling SP s importovanými značkami sú údaje o väzobnej kapacite nasledovné:

Väzbacapacita (mg/ml)	Sartorius	PALL	Vedenie
lyzozým	25	32	29
trypsín	22	27	25

Tabuľka 2. Výkonnosť väzbovej kapacity rôznych proteínov v našom produkte a konkurenčných značkách

Celkové hodnotenie ukazuje, že naša záväzná kapacita je porovnateľná s dovážanými výrobkami.

Obrázok 2. Test väzbovej kapacity modulu SP membránovej chromatografie s použitím lyzozýmu ako štandardu

V porovnaní s dynamickou väzbovou kapacitou a importovanými produktmi sa potvrdilo, že väčšinu cieľových proteínov možno zachytiť, keď sa lyzozým eluuje v 190 mM NaCl.

Prostredníctvom rôznych elučných podmienok sme zistili, že elučné profily membránovej chromatografie sú podobné profilom agarózového gélu, ale čistota proteínov sa výrazne líši pri rôznych koncentráciách solí. V skutočnom výskume, vývoji a výrobe je potrebné kvantitatívne určiť optimálne elučné podmienky, aby sa získali cieľové proteíny vysokej -čistoty.

 

4 Typické prípady použitia

Odstránenie DNA, vírusov a proteínov hostiteľskej bunky

Zachytenie plazmidov, vírusov, proteínov a purifikácia oligonukleotidov

Odstránenie pigmentov z kvasnicového fermentačného bujónu a vysokokapacitné zachytávanie bielkovín

 

5 Postup použitia

5.1 Príprava a montáž zariadenia:

5.1.1:Nainštalujte modul membránovej chromatografie na chromatografický systém ÄKTA podľa postupov podobných živicovým kolónam, pričom sa uistite, že smer toku je v súlade so šípkami modulu a orientáciou vstupu. Pripojte modul pomocou zámkov Luer alebo svoriek{2}}v štýle pre bezpečnú integráciu do systému.

5.1.2 Nastavte prietokovú rýchlosť na5–10 MV/mina odplynite modul pomocou ekvilibračného pufra, čím sa zabezpečí, že odpadová voda neobsahuje vzduchové bubliny. Po odplynení pripojte výstup permeátu k chromatografickému systému.

5.2:Liečba pred-použitím:

5.2.1:

Nastavte prietokovú rýchlosť na5–10 MV/mina vykonajte predbežnú{0}}liečbu pomocou0,5 M NaOH pre viac ako 5 MV, čím sa zabezpečí, že membrána dosiahne úplnú rovnováhu.

5.2.2: Pri rovnakej prietokovej rýchlosti vykonajte predbežnú{1}}úpravu s1 M NaCl na viac ako 5 MVaby sa zabezpečilo, že membrána dosiahne úplnú rovnováhu.

5.3 Chromatografický proces

5.3.1 Nastavte prietok na 5–10 MV/min a ekvilibrujte membránu ekvilibračným pufrom na viac ako 5 MV, kým membrána nedosiahne úplnú rovnováhu.

5.3.2 Po 0,22 μm pred-filtrácii naneste vzorku na membránu, kým sa naplnenie vzorky nedokončí alebo kým sa nedosiahne chromatografická väzbová kapacita.

5.3.3 Premývajte ekvilibračným pufrom viac ako 10 MV, kým sa UV signál nevráti na základnú líniu.

5.3.4 Použite gradientovú elúciu alebo postupnú elúciu podľa návrhu procesu a odoberajte frakcie podľa potreby.

5.4 Ošetrenie po použití CIP- – CIP zariadenia na membránovú chromatografiu (čistenie na mieste)

5.4.1 Nastavte prietokovú rýchlosť prívodu na 5–10 MV/min a vykonajte čistenie s 1 M NaOH na viac ako 10 MV, kým sa UV signál nezníži pod základnú čiaru.

5.4.2 Po 30 minútach cirkulácie prejdite na premývanie vodou, kým pH nedosiahne 7–8, potom pokračujte v čistení 20 % etanolom, kým sa vodivosť nestane takmer konštantnou.

5.5 Skladovanie membránovej chromatografie

Po použití a dokončení CIP je možné membránový modul vybrať a uskladniť namáčaním v 20 % etanole alebo ho možno skladovať -v linke pri izbovej teplote v roztoku obsahujúcom 20 % etanol. 20 % roztok etanolu by sa mal pravidelne kontrolovať a vymieňať.

 

6. Informácie o objednávaní

Q Silný aniónový výmenný membránový chromatografický kapsulový filter

	Laboratórna mierka	malého rozsahu	pilotná mierka	výrobného rozsahu
Model produktu	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Objem membrány	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Populárne Tagy: cm slabá iónová-membránová chromatografia, Čína, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, hromadné, na sklade, bezplatná vzorka